大鼠肺泡上皮细胞

上皮细胞覆盖于身体表面并衬贴于体内空腔器官腔面的细胞。其排列有明显极性，一面朝向身体表面或腔面，称游离面；一面向着深部的结缔组织，称基底面。上皮细胞具有强大的角生和更新能力。上皮组织具有保护、吸收、分泌和排泄等作用。当上皮细胞受损时，则影响机体的防御功能。大鼠肺泡上皮细胞为内皮细胞的一种。 有研究建立高浓度氧诱导在体大鼠肺泡细胞凋亡损伤模型，观察短时间内（4～8小时）吸入高浓度氧肺泡上皮细胞的损伤；观察一氧化氮及其合酶对急性吸入高浓度氧导致大鼠肺泡上皮细胞凋亡的影响；探讨线粒体途径和细胞酸化在氧化应激早期诱导的肺泡上皮细胞凋亡信号传导过程中的作用。将WISTAR大鼠放至于氧浓度为80－100％的氧箱中4、8、12、16小时，空气对照组放置于氧浓度为21％的氧箱中，实验分三部分，按实验目的不同制取样本做如下测试：1.比色法测定血浆、肺组织匀浆中丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶(SOD）、谷光甘肽（GSH）、过氧化氢酶（CAT）、一氧化氮（NO）、一氧化氮合酶（NOS）和总抗氧化能力（T-AOC）；HE染色观察肺组织常规病理变化，TUNEL染色法检测肺泡表面凋亡细胞；2.Westernblot检测肺组织中eNOS和iNOS蛋白表达，RT-PCR检测eNOSmRNA、iNOSmRNA的表达。3.RT-PCR检测bcl-2mRNA、baxmRNA、eNOSmRNA、iNOSmRNA的表达，Westernblot检测bcl-2、bax、Akt1/磷酸化-Akt1、mTOR/磷酸化-mTOR的蛋白表达；BCECF-AM检测细胞浆pH值，流式细胞仪(Flowcytometry，FCM)检测细胞增殖指数。结果：1.与对照组相比（凋亡2.17%），吸入高浓度氧4小时即出现典型的肺泡表面凋亡细胞(9.13±3.2％)，8～12小时组凋亡细胞的数量明显增加(17.47±3.5％、19.22±4.5％)，16小时组有减少的趋势(11.03±2.8％)。