HELA人宫颈癌细胞的应用

背景^[1-3]

HELA人宫颈癌细胞是一种来自人体组织的非整倍体上皮样细胞系，由Gey GO等在1951年从一名31岁女性黑人的宫颈癌组织中建立。这种细胞系具有高度增殖能力和稳定生长特性，常用于宫颈癌的研究和治疗。HELA人宫颈癌细胞系内部存在不同分化状态的细胞，这使得研究者可以对比研究细胞的分化过程和细胞信号通路的调控。此外，HELA人宫颈癌细胞具有多种基因突变，对某些治疗药物敏感，因此在药物筛选和临床试验中具有重要意义。

在科研领域，HELA人宫颈癌细胞被广泛用于癌症研究、生物学研究以及疫苗和药物研发。它们可以用于体外药物筛选和疫苗研制，也可以用于研究宫颈癌的发病机制和传播途径。此外，HELA人宫颈癌细胞还可以用于制备抗体和其他生物分子，为生物医学研究提供了重要的工具和资源。

HELA人宫颈癌细胞

HELA人宫颈癌细胞是一种常用的肿瘤细胞系，它是由人类宫颈癌组织中分离出来的。HELA细胞具有以下特点：

1.高度恶性：HELA细胞具有高度的恶性和侵袭性，可以快速生长和扩散。这使得HELA细胞成为研究肿瘤生物学和抗肿瘤药物筛选的重要模型。

2.易于培养：HELA细胞生长迅速，可以在常规培养条件下进行快速扩增。这使得HELA细胞成为实验室中常用的肿瘤细胞系之一。

3.丰富的生物学信息：HELA细胞具有丰富的生物学信息，包括基因表达谱、蛋白质组学特征等。这使得HELA细胞成为研究肿瘤发生和发展机制的重要模型。

4.广泛的应用：HELA细胞被广泛应用于肿瘤生物学、分子生物学、药物筛选等领域的研究。例如，HELA细胞被用于研究肿瘤细胞的增殖、凋亡、转移等生物学过程，以及抗肿瘤药物的筛选和评价等。

然而，在使用HELA人宫颈癌细胞的过程中也引发了一些伦理和隐私权的争议，因为这些细胞是从一位并不知情的女性身上获取的。因此，在使用HELA人宫颈癌细胞进行科学研究时，必须充分考虑和尊重伦理和隐私问题。

应用^[4][5]

HELA人宫颈癌细胞可以用于CYB5D2基因对人宫颈癌细胞HeLa增殖、侵袭转移中的抑制作用及其机制初步研究

检测CYB5D2蛋白在宫颈组织中的表达情况,分析CYB5D2表达水平与宫颈癌临床病理参数及生存预后的关系,及其与上皮细胞间质转化反应(epithelial-mesen chymal transitions,EMT)代表性标志物E-cadherin的相关性,初步探讨CYB5D2在宫颈癌侵袭转移过程中临床意义。进一步研究过表达CYB5D2基因对人宫颈癌HeLa细胞增殖、侵袭转移中的影响及潜在的分子机制,以期为临床探索宫颈癌基因治疗提供新的靶向位点。

方法:(1)免疫荧光实验检测CYB5D2和E-cadherin在正常宫颈组织、宫颈上皮内瘤变、宫颈癌组织中的表达情况及其临床意义;

(2) 本研究中HELA人宫颈癌细胞分为过表达CYB5D2实验组和空载对照组,Western blot和qRT-PCR实验检测各组HeLa细胞中CYB5D2蛋白及mRNA表达情况;

(3) MTS法、平板克隆形成实验检测过表达CYB5D2对HELA人宫颈癌细胞增殖能力的影响;

(4) 流式细胞术检测过表达CYB5D2对HELA人宫颈癌细胞周期的影响;

(5) 划痕实验检测过表达CYB5D2在HELA人宫颈癌细胞迁移率的变化,从而反应对细胞迁移能力的影响;

(6) Transwell侵袭实验检测过表达CYB5D2对HELA人宫颈癌细胞侵袭的影响;

(7) ELISA实验检测过表达CYB5D2对HELA人宫颈癌细胞上清中分泌MMP2、MMP9的影响;

(8) Western blot实验检测过表达CYB5D2对HELA人宫颈癌细胞EMT损伤反应相关蛋白E-cadherin、β-catenin、N-cadherin、Snail、Twist、Zeb2的变化。

结果:(1)免疫荧光结果显示,与19例正常宫颈组织、23例宫颈上皮内瘤变组织相比,CYB5D2和E-cadherin蛋白在99例宫颈癌组织中表达水平显著减弱(P<0.05);二者在不同类型的宫颈组织中表达均呈正相关(P<0.05);CYB5D2的表达与肿瘤的临床FIGO分期有关(P<0.05),E-cadherin的表达与肿瘤浸润深度、分化程度、临床FIGO分期有关(P<0.05);Kaplan-Meier生存分析显示,高表达CYB5D2 mRNA宫颈癌患者OS及RFS显著增加(P<0.05);

(2) Western blot和qRT-PCR结果显示,与空载对照组细胞相比,实验组HELA人宫颈癌细胞内CYB5D2蛋白及mRNA表达水平显著升高(P<0.05);

(3) MTS结果显示,过表达CYB5D2实验组HELA人宫颈癌细胞增殖速度、细胞数量明显低于对照组(P<0.05);平板克隆形成实验结果显示,过表达CYB5D2实验组细胞集落形成数目、集落大小明显低于对照组(P<0.05);

(4) 流式细胞术结果显示,过表达CYB5D2实验组HELA人宫颈癌细胞中处于G0/G1、G2/M、S期细胞占比变化不大(P>0.05);

(5) 细胞划痕实验结果显示,过表达CYB5D2实验组HELA人宫颈癌细胞平均迁移率显著低于对照组(P<0.05);

(6) Transwell侵袭实验结果显示,过表达CYB5D2实验组HeLa细胞发生侵袭的细胞数目显著低于对照组(P<0.05);

(7) ELISA实验结果显示,过表达CYB5D2实验组HELA人宫颈癌细胞上清中MMP2、MMP9的分泌量显著低于对照组(P<0.05);

(8) Western blot实验结果显示,过表达CYB5D2实验组HELA人宫颈癌细胞中E-cadherin、β-catenin蛋白表达逐渐升高,N-cadherin、Snail、Twist、Zeb2蛋白表达逐渐减少(P<0.05)。

结论:(1)在宫颈癌中,CYB5D2作为抑癌基因,有望成为评估宫颈癌患者预后标志物的潜在可能;

(2) 过表达CYB5D2对HELA人宫颈癌细胞具有增殖抑制、迁移抑制、侵袭抑制作用;

(3)CYB5D2对HELA人宫颈癌细胞发挥抑制作用的机制可能通过调控E-cadherin、β-catenin、N-cadherin、Snail、Twist、Zeb2等蛋白及转移相关因子MMP2、MMP9的表达,进而逆转EMT反应的发生,从而在宫颈癌中作为抑癌基因来发挥潜在的生物学效应。

参考文献

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[5]李冬雪.CYB5D2基因对人宫颈癌细胞HeLa增殖、侵袭转移中的抑制作用及其机制初步研究[D].遵义医科大学,2020.