Daudi/人成巨核细胞白血病细胞的介绍

背景及概述^[1]

巨核细胞白血病的特点是骨髓中有大量巨核细胞，血液中血小板显著增多。虽然国内外都有巨核细胞白血病病例的报道，但它是否为独立的白血病类型，学者们意见不一。这种病例须与骨髓纤维化伴有髓样化生或原发性血小板增多症相鉴别。原发的或慢粒急变所致的原巨核细胞白血病都较罕见。原巨核细胞胞浆很蓝，胞浆周围可有伪足样突出。过碘酸雪夫(PAS)反应胞浆中有大小粗细不等的阳性颗粒。该种细胞可有Ph1染色体。最近发现血小板含有与粒细胞不同的过氧化物酶，用电镜细胞化学技术可以诊断出光学显微镜或透视电镜不能诊断的原巨核细胞白血病。

Daudi/人成巨核细胞白血病细胞是1967年五月E.KleinandG.Klein从一位16岁黑人男性Burkitt's淋巴瘤患者建立的Daudi细胞株。表面免疫球蛋白阳性(sIg+)，Β2-微球蛋白阴性，EBNA阳性，并有衣壳抗原VCA。Daudi/人成巨核细胞白血病细胞携带EB病毒，是典型的B淋巴母细胞，广泛应用于白血病发生机理的研究。Daudi/人成巨核细胞白血病细胞培养基含1.5g/L碳酸氢钠，4.5g/L葡萄糖，10mMHEPES，1.0mM丙酮酸钠和2mML-谷氨酰胺的RPMI1640，90%；FBS，10%。人成巨核细胞白血病细胞在倒置镜下(是在4X物镜)观察整个细胞生长情况。

（一）如果细胞未长满，用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超菌台内，严格无菌操作，打开细胞培养瓶，吸出培养液，换10ml新鲜培养液后继续培养。

（二）如果细胞已长满，即可进行传代培养。具体步骤如下：1）弃去培养液，用PBS（不含钙，镁离子）洗1-2次。2）加1ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mMEDTA）于培养瓶中，倒放于37℃培养箱1-3分钟预热，之后翻转培养瓶10-30秒后，在倒置显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量完全培养基终止消化。3.按6-8ml/瓶补加完全培养基，轻轻打匀后吸出一半，分到新的培养瓶中。如果没有特别说明，收到细胞后的次传代一般是一传二。

注：

1）观察细胞在低倍镜（4或5X物镜)下进行，否则不能准确判断细胞的传代密度。看细胞的形态请在10X或20X物镜下。

2）瓶中运输培养基不能重复再用，请换用加双抗的新培养基，细胞冻存后，培养基中可不加任何抗生素。

3）有些细胞贴壁不牢，如发现贴壁细胞有脱落，可离心吹打后接种到新瓶内。

主要参考资料

[1] 中国医学百科全书·三十五血液病学