大鼠肝动脉平滑肌细胞的应用

背景^[1-3]

大鼠肝动脉平滑肌细胞取自大鼠新鲜肝脏动脉组织，经胰蛋白分解制得无菌平滑肌细胞，主要用于大鼠肝动脉平滑肌细胞体外科研实验。

平滑肌纤维呈长梭形，无横纹。平滑肌受自主神经支配，为不随意肌。该肌收缩缓慢、持久。细胞核一个，呈长椭圆形或杆状，位于中央，收缩时核可扭曲呈螺旋形，核两端的肌浆较丰富。平滑肌纤维大小不一，一般长200μm，直径8μm；小血管壁平滑肌短至20μm。

大鼠肝动脉平滑肌细胞

细动脉壁的平滑肌细胞多为一层。位于基底膜之外，而小动脉的平滑肌细胞呈二层或多层排列。位于内弹力板之外。典型的细静脉壁有一尚未发育成熟的平滑肌细胞：血管平滑肌细胞因部位不同（大动脉，肠系膜动脉，门静脉等）而有很大区别。

血管平滑肌细胞一般早长梭形。其大小因功能状态而不同。核呈长梭形，核两侧胞浆十细胞器较多，可见高尔基氏器、小的线粒体、少数粗面内质网及糖元颗粒。平滑肌细胞和横纹肌一样，胞浆中也有细肌丝肌动蛋白和粗肌丝肌凝蛋白山于平滑肌肌凝蛋白的溶解性高。

朴细胞山的离子环境小不能保持肌丝状态。固此从电镜观察到的肌丝排列不规则。也没有横纹。只是呈现多数仿纤维和梭形致密小体。后者相当于横纹肌的Z带；细动脉平滑肌细胞部分胞体可穿过基底膜。

应用^[4][5]

用于坎地沙坦对大鼠动脉平滑肌细胞间缝隙连接作用的研究

研究坎地沙坦对自发性高血压大鼠（Spontaneously Hypertensive Rat,SHR）脑微动脉段平滑肌细胞间膜电生理学的影响及血管平滑肌细胞间缝隙连接蛋白表达的影响。

方法：应用全细胞膜片钳技术，观察并比较Wistar大鼠和SHR脑动脉平滑肌细胞的生理学特性的异同，坎地沙坦和缝隙连接阻断剂2-APB干预对大鼠脑微动脉段上平滑肌细胞膜电生理学特性的影响。观察坎地沙坦干预14周后SHR脑微动脉段上平滑肌细胞膜电生理特性的改变。应用Wistar blot技术比较Wistar大鼠、SHR和坎地沙坦不同处理组大鼠脑动脉平滑肌细胞间缝隙连接蛋白43和45表达的异同。

结果：（1）SHR脑微动脉段上平滑肌细胞的Cinput和Ginput高于Wistar大鼠，差异有统计学意义（P<0.05）。缝隙连接阻断剂2-APB可以浓度依赖性的降低脑微动脉段上平滑肌细胞的Cinput和Ginput（或者增加Rinput），IC50分别为0.21μmol/L和0.83μmol/L，差异有统计学意义（P<0.05）。

（2）100μmol/L坎地沙坦对Wistar大鼠脑微动脉段上平滑肌细胞膜Cinput、Ginput和Rinput等电生理特性没有影响，差异无明显统计学意义（P>0.05）。但是给予坎地沙坦干预14周后，SHR脑微动脉段上平滑肌细胞的Cinput和Ginput高于Wistar大鼠，不同剂量坎地沙坦干预组的Cinput和Ginput低于SHR，差异均有统计学意义（P<0.05）。

（3）5mg/kg坎地沙坦能够抑制SHR脑动脉平滑肌细胞间缝隙连接蛋白43的下调，同时抑制SHR脑动脉平滑肌细胞间缝隙连接蛋白45的上调，差异有统计学意义（P<0.05）。1mg/kg坎地沙坦能够抑制SHR脑动脉平滑肌细胞间缝隙连接蛋白45的上调，差异有统计学意义（P<0.05）。

参考文献

[1]Cell–Cell Communication in the Kidney Microcirculation[J].CHARLOTTE MEHLIN SORENSEN,NIELS‐HENRIK HOLSTEIN‐RATHLOU.Microcirculation.2012(5)

[2]Spontaneous Lung Dysfunction and Fibrosis in Mice Lacking Connexin 40 and Endothelial Cell Connexin 43[J].Michael Koval,Marie Billaud,Adam C.Straub,Scott R.Johnstone,Alexander Zarbock,Brian R.Duling,Brant E.Isakson.The American Journal of Pathology.2011(6)

[3]Regulation of Blood Flow in the Microcirculation[J].STEVEN S.SEGAL.Microcirculation.2010(1)

[4]Connexin32 is expressed in vascular endothelial cells and participates in gap-junction intercellular communication[J].Takayuki Okamoto,Mari Akiyama,Mariko Takeda,Esteban C.Gabazza,Tatsuya Hayashi,Koji Suzuki.Biochemical and Biophysical Research Communications.2009(2)

[5]王洋.坎地沙坦对大鼠动脉平滑肌细胞间缝隙连接作用的研究[D].石河子大学,2014.