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U-87MG(U87MG)人脑星形胶质母细胞瘤细胞的应用

发布日期:2021/4/20 17:10:15

背景[1-3]

U-87MG(U87MG)人脑星形胶质母细胞瘤细胞是由Ponten·J等建立,源于恶性神经胶质瘤;U-87 MG细胞裸鼠皮下接种可成瘤。细胞不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌,培养条件:RPMI-1640+10%FBS;37℃,5%CO2。

U-87MG(U87MG)人脑星形胶质母细胞瘤细胞

胶质母细胞瘤是星形细胞肿瘤中恶性程度最高的胶质瘤。肿瘤位于皮质下,多数生长于幕上大脑半球各处。呈浸润性生长,常侵犯几个脑叶,并侵犯深部结构,还可经胼胝体波及对侧大脑半球。发生部位以额叶最多见。

胶质细胞瘤起源于星形细胞、少突胶质细胞或室管膜细胞,多数成人胶质瘤来源于星形细胞。综合发病年龄高峰在30-40岁,或10-20岁2个年龄段。在大脑半球发生的胶质瘤约占全部胶质瘤的51.4%,以星形细胞瘤(astrocytoma)为最多,其次是少突胶质细胞瘤(oligodendroglioma),脑室也是胶质瘤多发部位,占胶质瘤总数的23.9%,主要为室管膜瘤(ependymoma)。

胶质母细胞瘤(glioblastoma):成人的胶质母细胞瘤约占所有星形细胞瘤的一半。症状出现的平均年龄为62岁。胶质母细胞瘤的发生率随年龄增加,男性患者的比例较高。

肿瘤高度恶性,高度浸润性的肿瘤,侵犯破坏周围脑组织。生长快,病程短,自出现症状至就诊多数在3个月之内。坏死是这类胶质母细胞瘤病理学的标志,CT上表现为肿瘤中央部位的密度减低区域,周围为环形异常强化的肿瘤组织。该肿瘤可为原发性,也可由间变型星形细胞瘤进展而来。

应用[4][5]

用于EIF3C在人脑胶质瘤中的表达及其对脑胶质瘤U87MG细胞增殖作用的体内外研究

探讨了真核翻译起始因子3(e IF3)的核心亚基e IF3c在人脑胶质瘤中的作用。首先,采用免疫组织化学SP技术和RT-PCR技术检测了e IF3c在人脑胶质瘤和正常脑组织中的表达。

然后,利用慢病毒介导si RNA的方法,在体外实验中探讨了e IF3c基因沉默对U87 MG细胞的增殖、凋亡、细胞周期和克隆形成等的影响。随后,又建立了胶质瘤裸鼠移植模型,在体内实验中观察了e IF3c基因沉默对脑胶质瘤形成和增殖生长的影响。根据以上的实验结果,证实了e IF3c在脑胶质瘤的形成和进展中起着重要作用,以期在临床实践中为脑胶质瘤的基因治疗奠定极为重要的理论基础。

EIF3C在人脑胶质瘤和正常脑组织中的表达研究目的:采用免疫组织化学SP方法和逆转录聚合酶链式反应技术,检测e IF3c在人脑胶质瘤和正常脑组织标本中的表达情况,探讨e IF3c在脑胶质瘤中的表达与脑胶质瘤的病理级别、肿瘤大小、位置、病人年龄和性别等临床特性的相关性。

采用Brd U方法测定U87MG细胞增殖实验增殖细胞的DNA合成用Brd U方法进行测定。U87 MG细胞转染表达e IF3c-si RNA或scr-si RNA的慢病毒,培养48小时,悬浮并以合适的浓度在96孔板上接种,5%CO2、37C的培养箱内培养1-4天。加入稀释的溴脱氧尿苷(Brd U)后的第1天和第4天收集细胞,用酶标仪在450nm波长下测定其吸光度(OD),Brd U信号和细胞增殖根据吸光值进行分析。

参考文献

[1]A preclinical mouse model of glioma with an alternative mechanism of telomere maintenance(ALT)[J].Maya Jeitany,Jose Ramon Pineda,Qingyuan Liu,Rosa Maria Porreca,Fran?oise Hoffschir,Chantal Desmaze,David C.Silvestre,Patrick Mailliet,Marie‐Pierre Junier,Arturo Londo?o‐Vallejo,Evelyne Ségal‐Bendirdjian,HervéChneiweiss,Fran?ois D.Boussin.Int.J.Cancer.2015(7)

[2]Bevacizumab in high-grade gliomas:past,present,and future[J].Richard C Curry,Saurabh Dahiya,Vyshak Alva Venur,Jeffrey J Raizer,Manmeet S Ahluwalia.Expert Review of Anticancer Therapy.2015(4)

[3]The Challenges and the Promise of Molecular Targeted Therapy in Malignant Gliomas[J].Hongxiang Wang,Tao Xu,Ying Jiang,Hanchong Xu,Yong Yan,Da Fu,Juxiang Chen.Neoplasia.2015(3)

[4]Temozolomide and Radiotherapy versus Radiotherapy Alone in High Grade Gliomas:A Very Long Term Comparative Study and Literature Review[J].Salvatore Parisi,Pietro Corsa,Arcangela Raguso,Antonio Perrone,Sabrina Cossa,Tindara Munafò,Gerardo Sanpaolo,Elisa Donno,Maria Antonietta Clemente,Michele Piombino,Federico Parisi,Guido Valle,Chi-Feng Hung.BioMed Research International.2015

[5]郝进敏.EIF3C在人脑胶质瘤中的表达及其对脑胶质瘤U87MG细胞增殖作用的体内外研究[D].河北医科大学,2015.

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