内皮细胞培养基ECM的制备

背景及概述^[1]

血管内皮细胞又称内皮细胞，通常指衬于心、血管和淋巴管内表面的单层扁平上皮，它形成血管的内壁。内皮细胞是分布在脑、淋巴结、肺、肝脏、脾脏等等器官组织中的一些有共同特点的吞噬细胞的总称，他们吞噬异物、细菌、坏死和衰老的组织，还参与集体免疫活动，包括：1、血管收缩及血管舒张，从而控制血压；2、凝血(血栓形成及纤维蛋白溶解)；3、动脉硬化；4、血管生成；5、炎症及肿胀(如：浮肿)。6、内皮细胞亦控制一些物质，如白血球进出血管。血管内皮细胞最为重要的一个功能就是参与血管的形成，而在众多心血管疾病、糖尿病及其他原因引起的血管器质性病变中，很多情况下都是由于血管内皮细胞凋亡、坏死或是不再增殖引起的。因此血管内皮细胞就成为了现在很多研究的热点，这些研究以及实验往往需要用到大量的血管内皮细胞。内皮细胞培养基是专门为正常人类微血管内皮细胞体外培养设计的最适于其生长的完全培养基。是经灭菌的液体培养基，包含必需和非必需氨基酸、维生素、有机和无机化合物、激素、生长因子、微量矿物质和低浓度胎牛血清(5%)。该培养基缓冲体系为重碳酸盐，在含5%CO2的细胞培养箱中平衡后pH值为7.4。该培养基的配方能够选择性的促进正常人类微血管内皮细胞体外培养中的增殖和生长，并为其达到最理想营养平衡状态。现有技术中，采用M199基础培养基和10％胎牛血清作为培养基培养内皮细胞。然而此培养基培养的内皮细胞的增殖能力较差。因此需要研发新的内皮细胞培养基，提高内皮细胞的增殖能力。

内皮细胞培养基成分举例^[1]

包括500mLIMDM基础培养基；胰岛素0.5mg/mL；转铁蛋白5μg/mL；维生素C9μg/mL；牛血清白蛋白10μg/mL；碱性成纤维生长因子5ng/mL；血管内皮生长因子10ng/mL；干细胞生长因子8ng/mL；层粘连蛋白12ng/mL；表皮生长因子8ng/mL；非必须氨基酸35ng/mL和二甲双胍盐酸盐10mmol/L。

制备^[1]

将无血清基础培养基、胰岛素、转铁蛋白、维生素C、牛血清白蛋白、碱性成纤维生长因子、血管内皮生长因子、干细胞生长因子、层粘连蛋白、表皮生长因子、非必须氨基酸和二甲双胍盐酸盐混合，得到内皮细胞培养基。

参考文献

[1]CN201510473860.1一种内皮细胞培养基及内皮细胞的培养方法