"PA317 Cells(赠送Str鉴定报告)|逆转录病毒包被的NIH3T3细胞
细胞背景资料：胚胎；成纤维细胞；NIH Swiss
细胞形态：上皮细胞样
接收细胞相关问题：如不能在收到细胞后及时操作细胞，T２５及离心管发货的细胞将可以消毒后在３７度过夜，血清发货的细胞在室温下静置１-２天(注意不要放冰箱)，干冰发货的可以在确认干冰未完全升华时将细胞直接放回液氮或者-８０度冰箱，若干冰完全升华，请即刻复苏细胞。T２５瓶及离心管在培养箱平衡是为了让细胞尽快适应培养箱环境，同时使部分因运输导致脱落的细胞贴壁，此步骤非常必要。T２５瓶如果在显微镜下可以看到部分不贴壁的细胞，可以收集上清后离心(１２００rpm，５min)后，将沉淀用新的培养基重悬后接种至新的培养瓶或皿中。部分细胞在运输过程中，由于不断震荡及环境不适，可能导致细胞破碎死亡，从而使培养基中漂浮很多细胞碎片及颗粒状物质。这种情况下，平衡后，贴壁细胞用PBS洗两遍再加新的培养基培养或者传代至新瓶中培养即可；悬浮细胞可以离心(１０００rpm，３min)收集细胞，并用PBS重悬后再离心一次，再用新的培养基重悬并接种细胞。
细胞生长：贴壁
HepG2-luc细胞类似产品：：SKNO1细胞、TE 671细胞、NRK clone 49F细胞
SVG(P12)细胞类似产品：：BPH1细胞、NCI-SNU-886细胞、COLO320-DM细胞
Hs68细胞类似产品：：DMS 114细胞、OCI-LY-1细胞、M21细胞
H-2087细胞类似产品：：PL-12细胞、NIH/3T3细胞、MDA-MB-453细胞
BT-B细胞类似产品：：HET1A细胞、Eph4 1424细胞、G-292 clone A141B1细胞
PA317 Cells(赠送Str鉴定报告)|逆转录病毒包被的NIH3T3细胞
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
[细胞产品包装]鲜活细胞：T２５培养瓶(一瓶)或冻存细胞：１ml冻存管(两支)
悬浮细胞不容易转染：悬浮细胞是指细胞生长不依赖支持物表面，在培养液中呈悬浮状态生长，如淋巴细胞。在实验室经常会遇到悬浮细胞的转染，其和贴壁细胞转染还是有很大不同的。目前大多数实验室用的是脂质体类的转染试剂，脂质体转染是基于电荷吸引原理，先形成脂质体-DNA复合物，散布在细胞周围，然后通过细胞的内吞作用，将目的基因导入细胞内，而脂质体复合物与贴壁细胞的接触机会比悬浮细胞GAO出很多倍，所以，脂质体转染时悬浮细胞的转染效率要明显低于贴壁细胞。其次，脂质体试剂的毒性较大，这就使得悬浮细胞的转染更为困难了。另外，悬浮细胞不易培养，易死亡，也给细胞转染造成了一定的困难。为了提GAO悬浮细胞的转染效率，可以使用非脂质体的转染试剂，如纳米材料的。也可以使用电转染方法，针对悬浮细胞等难转染细胞还是挺不错的，电击对细胞有一定的损伤，ZuiHAO选用具有细胞膜修复功能的电转染试剂，可以将电击对细胞的伤害降到Zui低，悬浮细胞不易转染，选对试剂及良HAO的细胞培养环境才是关键。
细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
NCI-H2023细胞类似产品：：G-292细胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-5细胞、HOS (TE85)细胞
WM115-mel细胞类似产品：：L-Wnt3A细胞、SK-MES1细胞、Pt K1细胞
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PLA 802细胞类似产品：：MCF-7ADR细胞、Fukuoka University-Malignant mixed Mullerian Tumor-1细胞、MGH-UI细胞
HT-55细胞类似产品：：BT-474细胞、NS1/1-Ag4.1细胞、HLEB-3细胞
细胞来源说明：来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库
PA317 Cells(赠送Str鉴定报告)|逆转录病毒包被的NIH3T3细胞
细胞生长特性：贴壁
EFM-19细胞类似产品：：SKMES细胞、RD-ES细胞、HT-115细胞
RPMI 7951细胞类似产品：：X63.Ag8.653细胞、BEAS 2B细胞、SU-DHL-4细胞
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SW 1417细胞类似产品：：OB2细胞、SKMEL1细胞、U-2 OS细胞
WEHI-231细胞类似产品：：NCI-H2170细胞、CCC-HPF-1细胞、SW-900细胞
培养细胞真的不难，Zui关键几点：１)所有的东西使用，如果你用的血清、培养皿、培养基、胰酶什么的都是进口的，真的很难相信你会把细胞养坏；２)动作要快，胰酶消化，换液什么，细胞暴露在空气中的时间越少越HAO。另外，要掌握HAO胰酶消化时间，所谓的细胞状态差，很多时候是传代的原因；３)有时间的话，需要细胞计数，传相应数目的细胞到培养皿中，可以大致清楚细胞的生长曲线，不会临时要处理，手足无措；４)要做什么心里要非常清楚，合理安排时间，传代细胞的实验穿插进行，可以节省很多时间，也不会耽误别人的实验；５)个人的实验器具自己收一套，不要和别人混用，Zui近换了什么新的东西稍微记一下，试剂一旦怀疑污染，马上丢；６)传代细胞不能进去太多人，避免相互干扰。每天对待细胞比孝敬爹妈还用心，那真是捧在手里怕碎了，含在嘴里怕化了，看在眼里怕丢了，培养细胞时有哪些经验教训可以分享呢?１)严格无菌操作，多喷喷酒精，要是对灭菌的东西不放心，自己包自己送自己烘干；２)不要和别人共用试剂耗材，自己准备一套；３)有可能的话在拿到新细胞的时候做HAO支原体衣原体检测；４)水浴锅很脏，生化培养箱要是得手动加湿的话盘里的水也会很脏，勤换(灭菌水加进去)；５)晚上离开的时候ZuiHAO给传代细胞照紫外，超净台是用完就开；６)是同一时间就你一个人在用传代细胞在养细胞。
细胞复苏相关注意事项：１.取细胞的过程中注意带HAO防冻手套，护目镜。此项尤为重要，细胞冻存管可能漏入液氮，解冻时冻存管中的气温急剧上升，可导致爆炸。２.冻存液的问题：冻存液的配置已是常识，在这里不作详述，但二甲基亚砜(DMSO )对细胞不是完全无毒副作用，在常温下，二甲基亚砜对细胞的毒副作较大，因此，必须在１-２min内使冻存液完全融化。如果复苏温度太慢，会造成细胞的损伤，二甲基亚砜(DMSO)ZuiHAO选择进口产品。３.离心前须加入少量培养液。细胞解冻后二甲基亚砜浓度较GAO，注意加入少量培养液可稀释其浓度，以减少对细胞的损伤。４.离心问题：目前主要有两种见解。一种是解冻后的细胞悬液直接吹打均匀后分装到培养瓶中进行培养，第二天换液。因为离心的目的是两个，去除DMSO，去除死细胞，这个是标准流程，但对一般人来说，把握不HAO离心转速和时间，转的不够活细胞沉底的少，细胞就全被扔掉了，转过了活细胞会受压过大，死亡。此外在操作过程中容易污染，所以不推荐。另一种说法为细胞悬液中含有二甲基亚砜(DMSO)，DMSO对细胞有一定的毒副作用，所以须将离心后的液体前倒净，且一定倒干净。我在试验中按照常规的离心分装的方法进行复苏，结果无异常。５.细胞贴壁少的问题：教科书中说明冻存细胞解冻时１ml细胞液要加１０ml-１５ml培养液，而在我的试验中的经验总结为培养基越少细胞越容易贴附。６.复苏细胞分装的问题：试验中我的经验总结为复苏１管细胞一般可分装到１-２只培养瓶中，分装过多，细胞浓度过低，不利于细胞的贴壁。７.加培养基的量放入问题：这个量的多少的把握主要涉及到的问题DMSO的浓度，从如果你加培养基的太少，那么DMSO的浓度就会比较大，就会影响细胞生长，从以前的资料来看，DMSO的浓度在小于０.５%的时候对一般细胞没有什么影响，还有一个说法是１%。所以如果你的冻存液的浓度是１０%DMSO的话那么加１０ml以上的培养基就恰HAO稀释到了无害浓度。
Hs821T细胞类似产品：：ATC241细胞、HCC2279细胞、MZ-CRC-1细胞
293GP细胞类似产品：：BT.549细胞、H-23细胞、R3/1细胞
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PA317 Cells(赠送Str鉴定报告)|逆转录病毒包被的NIH3T3细胞
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BNL CL.2细胞类似产品：：TF1细胞、JURKAT E-6.1细胞、Colo-206F细胞
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KMS-11细胞类似产品：：NOR10细胞、UMNSAH-DF1细胞、KTCTL140细胞
CEM-T4细胞类似产品：：526细胞、Kit225-K6细胞、H295R细胞
SW 626细胞类似产品：：LC-1/sq细胞、HK-2 [Human kidney]细胞、159 PT细胞
RN细胞类似产品：：SCC-4细胞、4T1细胞、NCI-H1963细胞
HCC1428细胞类似产品：：P-388细胞、CTLL-2细胞、NR8383.1细胞
SW-1222细胞类似产品：：SEG1细胞、GTL 16细胞、RCK-8细胞
WEHI 231细胞类似产品：：Tn 5B1-4细胞、H1793细胞、H647细胞
Epithelioma Papulosum Cyprini细胞类似产品：：EOMA细胞、McCoy B细胞、MES-SA Dx5细胞
HIEC细胞类似产品：：Hs 600.T细胞、DoHH-2细胞、CCRF.CEM细胞
Panc-10.05细胞类似产品：：OVCA432_Bast细胞、GP2-293细胞、Rat1细胞
Human Melanoma Cell Bowes细胞类似产品：：Jeko1细胞、hEM15A细胞、Ca 9-22细胞
CATH.a细胞类似产品：：ECC 12细胞、NCIADRRES细胞、SUP-M2细胞
SK-N-BE(1)n细胞类似产品：：NSC34细胞、H-2023细胞、EAHY-926细胞
SW-1417细胞类似产品：：Jurkat FHCRC细胞、NCI-H889细胞、JURKAT E-6.1细胞
PA317 Cells(赠送Str鉴定报告)|逆转录病毒包被的NIH3T3细胞
NCI-H747细胞类似产品：：C 6细胞、BIC-1细胞、MDAMB134VI细胞
AMC-HN-8细胞类似产品：：BEL7405细胞、HMSC细胞、SKMES-1细胞
Wistar Institute, Susan Hayflick细胞类似产品：：HEK293-EBNA1细胞、RPMI-1846细胞、JROECL 21细胞
SW1271细胞类似产品：：BT325细胞、P3X63 AG8-653细胞、3T3L1细胞
SW-1271细胞类似产品：：HeLa/S3细胞、HEK293T/17细胞、DLD 1细胞
NCI660细胞类似产品：：87 MG细胞、NCI-H23细胞、MV 4;11细胞
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SK_HEP1细胞类似产品：：WIL2 S细胞、Panc 03.27细胞、Hk-2细胞
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MCF10-A细胞类似产品：：ME-1 [Human leukemia]细胞、SNU387细胞、SNU251细胞
HCC-1569细胞类似产品：：WSUDLCL2细胞、AN3 CA细胞、Hs606T细胞
H.Ep.-2细胞类似产品：：SNU-886细胞、PLA802细胞、BT-B细胞
SU.86.86细胞类似产品：：D6P2T细胞、U031细胞、IMR90细胞
KP-2细胞类似产品：：NBL-S细胞、Colo-206F细胞、NCI-SNU-16细胞
B16 melanoma F10细胞类似产品：：NCIH69细胞、OKT3细胞、EFO-27细胞
SGC-7901/DDP细胞类似产品：：CCD-841CoTr细胞、DHL5细胞、LLCPK1细胞
HBZY-1细胞类似产品：：OCI-AML-3细胞、HSC1细胞、P-388细胞
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CHG5细胞类似产品：：BE2-M17细胞、OCI-Ly1细胞、UCLA-SO-M20细胞
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