"SK-MEL-3 Thawing人恶性黑色素瘤细胞系
细胞背景资料：详见相关文献介绍
细胞形态：上皮细胞样
SK-MEL-3 Thawing人恶性黑色素瘤细胞系
细胞生长：贴壁
细胞冻存的步骤：１)选择处于对数生长期的细胞，在冻存前一天换液。将多个培养瓶中的细胞培养液去掉，用０.２５% 胰蛋白酶消化。适时去掉胰蛋白酶，加入少量新培养液。用吸管吸取培养液反复吹打瓶壁上的细胞，使其成为均匀分散的细胞悬液。悬浮生产细胞则不要消化处理。然后将细胞收集于离心管中离心(１０００r/min，１０分钟)；２)去上清液，加入含２０%小牛血清的完全培养基，于４℃预冷１５分钟后，逐滴加入已无菌的DMSO或甘油，用吸管轻轻吹打使细胞均匀，细胞浓度为５×１０６～１×１０７/mL之间。(冻存培养液的配置是不是一定要用小牛血清呢？答案是不一定的，具体要看培养的细胞类型来选择；３)将分装上述细胞悬液于２ml冻存管中，每管０.２５ml。冻存管要将盖子盖紧，并标记好细胞名称和冻存日期，同时作好登记(日期、细胞种类及代次、冻存支数)；４)将装好细胞的冻存管放到冻存盒中，-８０℃冰箱过夜。；如果有程序降温器(放在-８０℃冰箱过夜，放入液氮罐);或者可以在４℃，２h;然后转到-２０℃，２h;-８０℃，２h;放入液氮罐；５)细胞冻存在液氮中可以长期保存，但为妥善起见，冻存半年后，取出一只冻存管细胞复苏培养，观察生长情况，然后再继续冻存。
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支)
细胞传代方法：１：３-１：５传代，２-３天换液１次。
细胞传代培养实验：体外培养的原代细胞或细胞株要在体外持续地培养就必须传代，以便获得稳定的细胞株或得到大量的同种细胞，并维持细胞种的延续。培养的细胞形成单层汇合以后，由于密度过大生存空间不足而引起营养枯竭，将培养的细胞分散，从容器中取出，以１:２或１:３以上的比率转移到另外的容器中进行培养，即为传代培养；细胞“一代”指从细胞接种到分离再培养的一段期间，与细胞世代或倍增不同。在一代中，细胞培增３～６次。细胞传代后，一般经过三个阶段：游离期、指数增生期和停止期。常用细胞分裂指数表示细胞增殖的旺盛程度，即细胞群的分裂相数/１００个细胞。一般细胞分裂指数介于０.２％～０.５％，肿瘤细胞可达３～５％；细胞接种２～３天分裂增殖旺盛，是活力时期，称指数增生期(对数生长期)，适宜进行各种试验。实验步骤：１.将长成的培养细胞从二氧化碳培养箱中取出，在超净工作台中倒掉瓶内的培养液，加入少许消化液。(以液面盖住细胞为宜)，静置５～１０分钟。２.在倒置镜下观察被消化的细胞，如果细胞变圆，相互之间不再连接成片，这时应立即在超净台中将消化液倒掉，加入３～５ml新鲜培养液，吹打，制成细胞悬液。３.将细胞悬液吸出２ml左右，加到另一个培养瓶中并向每个瓶中分别加３ml左右培养液，盖好瓶塞，送回二氧化碳培养箱中，继续进行培养。一般情况，传代后的细胞在２小时左右就能附着在培养瓶壁上，２～４天就可在瓶内形成单层，需要再次进行传代。
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
SK-MEL-3 Thawing人恶性黑色素瘤细胞系
细胞生长特性：贴壁生长
细胞复苏基本方法：１．从液氮罐中取出安剖；有时因安剖未封严，浸入了液氮，取出后因安剖内液氮迅速气化而发生爆炸，因此应带有防护眼睛和手套。２．迅速放入盛有３６℃～３７℃水的搪瓷罐中，扣上盖并不时摇动，尽快解冻。３．剪开纱布口袋，取出安剖，用７０％酒精擦拭消毒后，净化台上打开盖，用吸管吸出细胞悬液，装入离心管中，再补加１０ml培养液，吹打使细胞悬浮。４．低速离心（５００～１０００转/分）５分钟，取上清后再重复用培养液漂洗、离心。５．加入培养液适当稀释后，再移装入培养瓶中，置温箱培养，次日更换一次培养液后再继续培养。收到T２５ flask细胞时，处理方式为：在寄送过程中，为避免起泡造成细胞脱落死亡，T２５ flask均加满培养基。请检查flask外观，并于显微镜下观察细胞生长状况和有无污染现象，若有任何问题，不要打开盖子，请立即通知细胞实验室。将原封之T２５ flask静置于３７°C，５%CO２培养箱中，使细胞回温至３７°C，并让运送过程中少数脱落的细胞可再附着生长。隔天后，于无菌操作箱内取出flask内之培养基(取出之培养基可以再使用)，仅留约５-１０ml培养基于flask内，依一般培养方式再将细胞置入培养箱中，或细胞已长满盘，则将细胞做传代培养。
细胞形态特性：成纤维细胞
NCI-157细胞系相关产品：KP-N-RT细胞、NCIH378细胞、HCC0038细胞
HR1K细胞系相关产品：JB6 Cl 30-7b细胞、TM-4细胞、IB-RS2细胞
SK-RC-52细胞系相关产品：SC细胞、H4IIE细胞、HT 1080.T细胞
Hs 606细胞系相关产品：L132细胞、NCI-H2081细胞、NTERA-2 clone D1细胞
NCIH841细胞系相关产品：C33-A细胞、HARAB细胞、NCI-SNU-761细胞
U118-MG细胞系相关产品：SV-HUC细胞、brain-derived Endothelial cells.3细胞、GH 3细胞
BALL-1细胞系相关产品：HepG2细胞、SACC-LM细胞、LCLC-103H细胞
NCI-H23细胞系相关产品：HEL-92细胞、H676细胞、VSMC细胞
WEHI164细胞系相关产品：RMS 13细胞、BL2141细胞、HCC0202细胞
WM-239-A细胞系相关产品：Daudi细胞、Jurkat (clone E6-1)细胞、MKN-28细胞
P30-OHKUBO细胞系相关产品：BALB/3T3 (clone A31)细胞、SW13细胞、Renal Carcinoma细胞
NSH细胞系相关产品：THC-8307细胞、LA-N-6细胞、HEK 293 EBNA细胞
Loucy细胞系相关产品：Hep G2/C3A细胞、Mc Ardle 7777细胞、Hs294T细胞
AML 12细胞系相关产品：Kit225 K6细胞、NCI-H1882细胞、NCIN87细胞
McA-RH 7777细胞系相关产品：H157细胞、Eca-109细胞、SW1222细胞
UM-UC-14细胞系相关产品：CF-1 MEF细胞、NIH 3T3细胞、HCC1500细胞
HPB/ALL细胞系相关产品：SP-2/0-AG14细胞、H-1299细胞、HGBEC细胞
Doubling time: ~50 hours (ATCC).细胞系相关产品：OV1/P细胞、HFL细胞、RBSMC细胞
NCIH1299细胞系相关产品：H1650_CO细胞、JS1细胞、Swiss 3T6细胞
Bat lung细胞系相关产品：LTEP-sm细胞、SHI1细胞、H-187细胞
AM38细胞系相关产品：RPMI8226/S细胞、VMRCLCD细胞、Co 205细胞
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COLO-680N细胞系相关产品：HEK-293FT细胞、KP 4细胞、HGSMC细胞
MSTO211H细胞系相关产品：NFS-60细胞、SUM-159PT细胞、CATH-a细胞
NCI-522细胞系相关产品：SR细胞、He La细胞、TE14细胞
BLO 11细胞系相关产品：COR-L105细胞、HEK-2细胞、MKN28细胞
SK-MEL-3 Thawing人恶性黑色素瘤细胞系
SACC-LM细胞系相关产品：HIEC6细胞、HCC-1187细胞、Tu-177细胞
University of Arizona Cell Culture-812细胞系相关产品：WEHI 231细胞、HCC-1143细胞、NCIH460细胞
C4-2 B细胞系相关产品：AR41P细胞、EB-3细胞、Panc-813细胞
U-373 MG细胞系相关产品：L-132细胞、Huh7.5.1细胞、GS9L细胞
NCI-H1618细胞系相关产品：3396细胞、H-1417细胞、SNU-1细胞
SW-756细胞系相关产品：CD-18细胞、H250细胞、PTK2细胞
CAL27细胞系相关产品：MDA MB 231细胞、R.K.13细胞、TO175T细胞
NBL-2细胞系相关产品：NPC-039细胞、Farage Original Line细胞、EFM192B细胞
F442-A细胞系相关产品：MOLT-16细胞、DH 82细胞、UCLA-SO-M14细胞
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BNCL2细胞系相关产品：H647细胞、IGR.OV1细胞、U-251_MG细胞
HBVSMC细胞系相关产品：CAL-27细胞、Kelly细胞、OCI AML4细胞
Centre Antoine Lacassagne-85-1细胞系相关产品：CHP-212细胞、Caco2BBe细胞、MDA330细胞
RPMI no 8226细胞系相关产品：NCIH82细胞、KYSE-450细胞、ARH77细胞
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U-343MG细胞系相关产品：NCI-SNU-601细胞、SW480E细胞、DB细胞
NRK-49F细胞系相关产品：SK-MEL 28细胞、SK-N-BE细胞、MCCAR细胞
Pro-5WgaRI3C细胞系相关产品：NCI-SNU-423细胞、NCIH69细胞、Hs 934.T细胞
Line 870 Emory University-4细胞系相关产品：CCD841CoTr细胞、U343细胞、Wien-133细胞
HO-8910细胞系相关产品：H2081细胞、LA-795细胞、SUM159PT细胞
NK92细胞系相关产品：HSC5细胞、PC-9/S1细胞、N1S1细胞
BJA-B-1细胞系相关产品：GES1细胞、OVCAR-10细胞、SLMT-1细胞
CMT 167细胞系相关产品：LLC-PK(1)细胞、VERO76细胞、RL95-2细胞
UO.31细胞系相关产品：MDA-MB-134 VI细胞、GB-1细胞、NBL-1细胞
IGROV细胞系相关产品：HCT8细胞、NFHIOSE-80细胞、PA-1细胞
JIMT-1细胞系相关产品：TFK1细胞、H-1568细胞、BJA-B细胞
PLC PRF 5细胞系相关产品：RLE-6TN细胞、U-2932细胞、DMS-53细胞
CCRF-CEM C7细胞系相关产品：1301细胞、Colon 26细胞、Alexander细胞
HCC-1954BL细胞系相关产品：Walker256-TC细胞、WSUDLCL2细胞、MEF细胞
HET1A细胞系相关产品：COR-L279细胞、Mv 1 Lu细胞、HAVSMC细胞
Swiss-3T3细胞系相关产品：H-1688细胞、Capan2细胞、HCC1395细胞
A172细胞系相关产品：OCI-Ly 8细胞、SN12C-PM6细胞、RPMI-7951细胞
Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-4细胞系相关产品：MDA-MB361细胞、SW-837细胞、Cloudman M3细胞
SK-MEL-3 Thawing人恶性黑色素瘤细胞系
10T1/2细胞系相关产品：BGC-823细胞、MT2细胞、NTERA2细胞
HCC-202细胞系相关产品：RT4细胞、NB1-RGB细胞、ND7/23细胞
RIMEC细胞系相关产品：AKR细胞、H-2081细胞、H8细胞
NK92MI细胞系相关产品：KYSE 450细胞、Biologics Standards-Cercopithecus-1细胞、Lu99A细胞
EST81细胞系相关产品：HCC-1954细胞、WB-F344细胞、OVCAR.3细胞
MES23.5细胞系相关产品：NCI-SNU-1040细胞、L Wnt-3A细胞、SN12CPM6细胞
CAL 78细胞系相关产品：SNU-387细胞、U138-MG细胞、MB49细胞
RAW-264.7细胞系相关产品：HCC1937细胞、G361细胞、NCIH2029细胞
MDA-MB-468细胞系相关产品：V79-4细胞、H82细胞、Ra No. 1细胞
H1915细胞系相关产品：MNNG/HOS细胞、AD293细胞、SCC 25细胞
Evsa T细胞系相关产品：SF-539细胞、U138细胞、IOSE 80细胞
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