BHK-21 Adherent仓鼠肾成纤维细胞系

"BHK-21 Adherent仓鼠肾成纤维细胞系
细胞背景资料：详见相关文献介绍
细胞形态：成纤维细胞样
贴壁细胞传代：去掉原T25培养瓶里面的培养基，T25瓶加3-4ml PBS洗1-2次；弃PBS，再加1.5 ml的Trypsin-EDTA(1X)消化液消化细胞，显微镜下观察，待细胞变圆，细胞间隙明显，部分细胞刚开始脱离瓶壁，加4 ml左右完全培养液混匀终止消化，将细胞小心吹打下来，1000rpm/min室温离心5min；弃上清，细胞沉淀用完全培养液重悬，按要求分瓶（视细胞密度而定1:2-1:3，1:3-1:6，1:6-1:8），每T25瓶补足培养基至5-6ml，37℃、5%CO2孵箱培养。悬浮细胞传代：一般仅需持续加入新鲜培养基于原培养角瓶中，稀释细胞浓度即可，若培养液太多时，将细胞悬液移入离心管中，1000rpm/min 室温离心5min。弃上清，细胞沉淀用完全培养液重悬，按要求分瓶（视细胞密度而定1:4-1:8），每T25瓶加完全培养液至4-5ml，37℃、5%CO2孵箱培养。有些悬浮细胞趋于成团生长，此时细胞生长状态良好，当补液时，需避免反复吹打。
细胞生长：贴壁
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
BHK-21 Adherent仓鼠肾成纤维细胞系
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支)
细胞培养方面注意的几点：无菌意识要强：实验进行前，超净台以紫外灯照射３０分钟灭菌，以７０%ethanol擦拭无菌操作抬面，并开启超净工作台风扇运转数分钟后，才开始实验操作。每次操作只处理一株细胞株，以避免失误混淆或细胞间污染。实验完毕后，将实验物品带出工作台，以７０%ethanol擦拭无菌操作抬面。无菌操作工作区域应保持清洁及宽敞，必要物品，例如支架、吸管等公用物品可以暂时放置，其它个人实验用品用完应立即拿出。实验用品以７０%乙醇擦拭后才带入无菌操作台内。实验操作应在中央无菌区域，一般勿在边缘区域操作。小心取用无菌之实验物品，避免造成污染。勿碰触吸管尖头部或是容器瓶口，亦不要在打开之容器正上方操作实验。容器打开后，以手夹住瓶盖并握住瓶身，倾斜约４５°角取用，尽量勿将瓶盖盖口朝上放置桌面。选择正确的培养基：不同的细胞可能培养基不同，甚至不同的文献可能对相同的细胞培养基成分也是可能不同的。如我当时培养神经干细胞，有文献就选用neurobase培养基，而我的实验目的主要是做抗氧化和氧化方面的，而这种培养基中含有抗氧化剂成分，此时，我就不得不选择另外一种不含抗氧化剂的培养基。瓶装血清一定要逐步解冻:４℃冰箱全溶后再分装，在溶解过程中须规则摇晃均匀(小心勿造成气泡)，使温度与成分均一，减少沉淀的发生。勿直接由–２０℃直接至３７℃解冻，因温度改变太大，容易造成蛋白质凝结而发生沉淀。热灭活是指５６℃，３０分钟加热已完全解冻之血清。水浴锅升到５６℃后，将血清放入，待温度升高到５６℃后计时，一般５分钟左右规则摇晃均匀一次。此热处理之目的是使血清中之补体成份去活化。除非必须，一般不要作此热处理，因为会造成沉淀物之显著增多，且会影响血清之品质。注意更换新血清(包括不同批次)对细胞的影响。
Ramos-2G6-4C10细胞系相关产品：BT 549细胞、PANC0327细胞、COS7细胞
HIT T15细胞系相关产品：SuDHL 8细胞、DH82细胞、TCMK-1细胞
EC-GI细胞系相关产品：MV-3细胞、PK13细胞、293-GP细胞
细胞传代方法：１：２传代，每周换液１-２次。
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
Duke University 4475细胞系相关产品：SUM-190PT细胞、EM3细胞、CMT64细胞
CHP212细胞系相关产品：CTV1细胞、T-98细胞、Farage Original Line细胞
KRCY细胞系相关产品：MDCK-II细胞、Ly18细胞、MDA231-LM2细胞
细胞生长特性：贴壁生长
BHK-21 Adherent仓鼠肾成纤维细胞系
细胞形态特性：成纤维细胞样
细胞培养相关培养基选购基本指南：如何选择培养基：经常听到有人问，这种细胞该用哪一种培养基呢?其实这个问题的答案可以很简单，也可以好复杂。为什么这样说呢?如果这种细胞是购自一些细胞库，那很简单，问供应商就行了。或者找到相关的文献，作为参考。培养基这么多种，要选择起来也是个头疼的事情。除了部分培养基是公开配方的，或者是专门针对某一种细胞的，如昆虫基本培养基和神经祖细胞基础培养基， 但是大部分液体培养基都是专利配方的，也就是说其中的成分是保密的。那么你只能是检索文献、让供应商推荐，然后用自己的细胞做几次传代培养来选出最合适的培养基。毕竟实践出真知。怎么样才可以买到好的培养基产品：首先，当然需要找对品牌，其次是找对自己所在区域的品牌代理商，针对自己所养的细胞，咨询供应商该选用哪种的培养基进行培养，这样就可以买到好的而且适合自己的培养基产品。关于培养基品牌，目前公司所知道的高校实验室有些同学在用Corning系列培养产品，也有同学在用Invitrogen(GIBCO)、Thermo Fisher(HyClone)等品牌的产品。培养基的选择和使用；MEM：成分简单，贴壁细胞；DMEM：分高糖型和低糖型；IDMEM：适合细胞密度低，生长困难的细胞。如杂交细胞的筛选，DNA转染后转化细胞的筛选培养；RPM１６４０：应用最广泛的培养基之一。悬浮细胞培养，主要针对淋巴细胞，也适合其他细胞；１９９、１０９培养基：成分齐全，培养效果较好；F１０培养基：适合小鼠及人类二倍体细胞培养；F１２培养基：适合单细胞分离培养及无血清培养；McCoy’s５A培养基：特别适合原代细胞及较难培养细胞的生长。
SW 1573细胞系相关产品：Sp 2817细胞、CBRH7919细胞、MDA231细胞
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BHK-21 Adherent仓鼠肾成纤维细胞系
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SUM-149细胞系相关产品：RAMOS2G64C10细胞、HMEC-1细胞、KYSE-150细胞
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BTI-TN5B1-4细胞系相关产品：HASMC细胞、NTera 2/cl.D1细胞、Human Pancreatic Duct Epithelial细胞
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BHK-21 Adherent仓鼠肾成纤维细胞系
H69C细胞系相关产品：H522细胞、MEF (CF-1)细胞、Jurkat E6-1细胞
MKN-45细胞系相关产品：SHSY-5Y细胞、HPB/ALL细胞、MCF-7细胞
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