"LLC-MK2 Cell:恒河猴肾细胞系
细胞形态：上皮细胞样
细胞生长：贴壁
细胞背景资料：胚胎；肾；自发永生
COLO.205细胞系相关产品：PC3细胞、RCM1细胞、NCI-1155细胞
SK HEP 01细胞系相关产品：HcaF细胞、Wien-133细胞、CAMA-1细胞
B16 F1细胞系相关产品：JROECL33细胞、H-1703细胞、LC-MS细胞
MARC 145细胞系相关产品：CoCL2细胞、CP70细胞、T-T细胞
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
LLC-MK2 Cell:恒河猴肾细胞系
因为细胞生长的时候肯定是要相互联系，大部分的细胞都是要成片生长的，尤其是对于贴壁细胞，单个细胞贴壁之后长着长着就长到一片去了。但是如果是成片的细胞抱团的话，传代后细胞是不能贴壁的，这样抱团的细胞就会死亡。所以，消化传代的时候一定要将细胞消化成单个单个的独立状态，这个啊是非常考究你的功夫的！细胞一旦脱落入悬液里你很难再将他吹打成单个，因为他没有受力点了。很难找到受力点让你对他吹打的力分散开细胞。所以必须要在细胞未脱落之前将其吹打开，受力点就是细胞贴壁的地方。这样你就必须要严格控制好消化的程度啊，这和大师做饭掌握好火候是一样的道理啊。既要消化到容易吹打下来，又不能太过，一吹就整片脱落，要单个单个地往下掉。所以我才要分批分次地加胰酶消化就是为了保证不同生长状态贴壁程度的细胞能够都维持在好的受力点分散开。这个是很重要的一点。尤其是对于某些细胞这一点就是他活去死的致命点。像Caco-２细胞就是如此。另外关于传代很重要一点就是一定不能等到细胞长满的时候才去消化传代。要在细胞长到７０%左右的时候就要传代了，一旦发现细胞生长中已经有叠层生长的时候就要立即进行消化传代。不能再拖了。关于换液传代时候洗瓶的问题。对于用DMEM培养基培养的细胞，你在洗的时候如果是用无血清１６４０去洗细胞在随即后的几次中会比用DMEM洗的长的要好。同样，用１６４０培养的也有这个现象。如果不嫌麻烦的话，可以用PBS来洗，洗的效果和用无血清培养基洗的效果基本上是一样的，对于有些细胞会更胜一筹。洗的目的主要是洗去培养瓶里残留的血清，防止它对胰酶的影响。这样能够保证胰酶的消化能力优先，是很关键的一点。先补充这么多，还会后续更新。再补充一点：传代时PBS洗是很重要的一步，最近发现，用PBS就可以把细胞消化开来。加入PBS放置１０-１５分钟，有些需要更长的时间，等到细胞一个个分离开来的时候，就可以直接吹打下来，但是和胰酶消化一样，要控制好时间，不能时间太过了，要不然损伤细胞，细胞不容易成活，状态容易不好。这个方法对于某些细胞是很管用的。有些细胞用胰酶消化不容易消化成单个的时候，或者临时没有胰酶了，可以选用此方法。不过一定要试试，看是否适合你的细胞。
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支)
细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
为什么培养的细胞要及时传代？体外培养的细胞大多具有生长接触抑制的特性，也就是说当一个细胞被其他细胞包围的时候，它就会停止生长，及时传代后，细胞的生长得以继续。培养细胞生长减慢的原因在哪些?其解决办法有哪些？可能的原因有：更换了不同的培养液或血清；培养液中一些细胞生长必需成分如谷眈肢或生长因子等耗尽或缺乏或己被破坏；培养物中有少量细菌或真菌污染；试剂保存不当；比较新培养液与原培养液成分，比较新血清与旧血清等，找出其它可能的原因。解决办法：增加起始培养细胞浓度；让细胞逐渐适应新培养液；换入新鲜配制培养液；补加谷酷肢或生长因子等；用无抗生素培养液培养，如发现污染，去弃培养物，或用抗生素除菌；血清需保存在５℃到２０℃; 培养液需在２-８℃避光保存;含血清完全培养液在２-８℃保存，并在２周内用完;分离培养物，检测支原体。冷冻管应如何解冻？取出冷冻管后，须立即放入３７℃水槽中快速解冻，轻摇冷冻管使其在１-２分钟内大部分融化，特别注意，需残留一小块冰块，就可拿到超净工作台操作细胞，用７５%酒精消毒冻存管，用新鲜培养基将细胞转移至培养瓶。另外冷冻管由液氮桶中取出解冻时，必须注意安全，预防冷冻管爆裂。
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
MLOY4细胞系相关产品：PC615.3细胞、GM346细胞、GM00346细胞
RD-ES细胞系相关产品：BSC1细胞、H-810细胞、OCI-AML-4细胞
NFS60细胞系相关产品：HUT-125细胞、PLC PRF 5细胞、P1-Raji细胞
DLD 1细胞系相关产品：PC-3细胞、MCF-12A细胞、NK-92 transfected with MFG-hIL2细胞
TE-85细胞系相关产品：Calf Pulmonary Artery 47细胞、MDCK Type II细胞、COLO-320细胞
细胞生长特性：贴壁
LLC-MK2 Cell:恒河猴肾细胞系
细胞冻存复苏材料与方法步骤：常用的细胞冷冻贮存器为液氮贮存器，规格有３５L和５０L两种。使用时要注意以下几点：(１)一般两周需充液氮一次，至少一个月充氮一次。液氮温度达-１９６℃，使用时注意勿让液氮溅到皮肤上，以免引起冻伤。(２)液氮容器为双层结构，中间为真空层，瓶口有双层焊接处，应防止焊接部裂开。(３)在装入液氮时，要注意缓慢小心，并用厚纸卷筒或特制漏斗作引导，使液氮直达瓶底，如有专用液氮灌注装置则更好。若为初次使用，加液氮时更要缓慢，以免温度骤降而使容器损坏。细胞冻存时常备的材料有：０.２５%胰蛋白酶，含１０%～２０%的血清培养液，DMSO(分析纯)或无色新鲜甘油(１２１°C蒸气高压消毒)，２mL安瓿(或专用细胞冻存管)、吸管、离心管、喷灯、纱布袋(或冻存管架)等。主要操作步骤为：(１)选择处于对数生长期的细胞，在冻存前一天换液。将多个培养瓶中的细胞培养 液去掉，用０.２５%胰蛋白酶消化。适时去掉胰蛋白酶，加入少量新培养液。用吸管吸取培养液反复吹打瓶壁上的细胞，使其成为均匀分散的细胞悬液。悬浮生产细胞则不要消化处理。然后将细胞收集于离心管中离心(１０００r/min，１０分钟)。(２)去上清液，加入含２０%小牛血清的完全培养基，于４℃预冷１５分钟后，逐滴加入已无菌的DMSO或甘油，用吸管轻轻吹打使细胞均匀，细胞浓度为３×１０６～１×１０７/mL之间。(３)将上述细胞分装于安瓿或专用冷冻塑料管中，安瓿装１～１.５mL在火焰喷灯上封口，封口处要完全封闭，圆滑无勾。冷冻管要将盖子盖紧，并标记好细胞名称和冻存日期，同时作好登记(日期、细胞种类及代次、冻存支数)。(４)将装好细胞的安瓿或冻存管装入沙布袋内;置于液氮容器颈口处存放过夜，次日转入液氮中。采用控制降温速度的方法也可采用下列步骤：先将安瓿置入４℃冰箱中２～３小时，再移至冰箱冷冻室内３～４小时，再吊入液氮容器颈气态部分存放２小时，最后沉入液氮中。细胞冻存在液氮中可以长期保存，但为妥善起见，冻存半年后，取出一只安瓿细胞复苏培养，观察生长情况，然后再继续冻存。
细胞形态特性：详见细胞说明书
HSC 3细胞系相关产品：P1-Raji细胞、YES2细胞、SNU368细胞
P3-NS1/1-Ag4-1细胞系相关产品：NHLF细胞、NCI-H524细胞、Caco 2细胞
174xCEM.T2细胞系相关产品：NCI-H446细胞、GA10细胞、H-460细胞
NFHIOSE-80细胞系相关产品：Renal Proximal Tubule Epithelial Cells/TERT-immortalized 1细胞、RBL2H3细胞、COLO394细胞
C32 mel细胞系相关产品：MESSA-DX5细胞、C1R细胞、NGEC细胞
GA-10 clone 4细胞系相关产品：P388.D1细胞、Hs 636 T细胞、SNU-869细胞
SNU-354细胞系相关产品：SK RC 20细胞、Ketr-3细胞、NCTC-1469细胞
LLC-MK2 Cell:恒河猴肾细胞系
KP-N-NS细胞系相关产品：CV 1细胞、NTERA-2cl.D1细胞、OVCAR420细胞
Calu-6细胞系相关产品：GTL-16细胞、SW-13细胞、GM06141细胞
CCRF/CEM-C7细胞系相关产品：SLMT-1细胞、COLO206细胞、SCCVII/St细胞
P3-X63-Ag 8.653细胞系相关产品：NCIH1618细胞、NBLS细胞、TGW细胞
HDQ-P1细胞系相关产品：HCT.116细胞、A-673细胞、HIEC细胞
GTL-16细胞系相关产品：H35 Reuber细胞、SNG-M细胞、Colo205细胞
MAEC细胞系相关产品：NCIH820细胞、TF1细胞、RBL细胞
Gejiu Lung Carcinoma-82细胞系相关产品：NCI-H1395细胞、87 MG细胞、OCILY-3细胞
HMy2.CIR细胞系相关产品：P3X63 Ag8.653细胞、OCI/AML3细胞、MC-38细胞
HMy2.CIR细胞系相关产品：P3X63 Ag8.653细胞、OCI/AML3细胞、MC-38细胞
C4-2B细胞系相关产品：H-II-E-C3细胞、FRO81-2细胞、LCD细胞
CL 1-0细胞系相关产品：HFT-8810细胞、U373-MG细胞、NCI-H292细胞
N-Tera-2细胞系相关产品：RBL-2H3细胞、IEC 18细胞、PC-3M IE8细胞
COLO-320细胞系相关产品：AML-12细胞、LLCMK2细胞、SSP-25细胞
Vx-2细胞系相关产品：HuPT3细胞、GL-261细胞、Sun Yat-sen university Ophtalmic center-Retinoblastoma 50细胞
SMMC-7721细胞系相关产品：CCD841CoN细胞、NCIH1651细胞、L Wnt-3A细胞
OUMS-27细胞系相关产品：KYSE270细胞、H774细胞、B-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1细胞
MHCC 97-H细胞系相关产品：NIT-1细胞、SW-626细胞、16HBEo-细胞
H1793细胞系相关产品：TGW-nu-1细胞、SVEC 4-10细胞、SK Mel 1细胞
HFSF细胞系相关产品：526-mel细胞、C4-I细胞、TE15细胞
SNU216细胞系相关产品：MyLa 2059细胞、DI-TNC1细胞、HeLa细胞
PT-K75细胞系相关产品：KBM5细胞、NCIH548细胞、HMVEC细胞
T1-73细胞系相关产品：PM6细胞、C12细胞、CL MC/9细胞
GM637细胞系相关产品：OCI-Ly19细胞、DMS273细胞、H865细胞
IOSE29细胞系相关产品：C32r细胞、SCC7细胞、CORL26细胞
QG56细胞系相关产品：EVSA/T细胞、U-343MG细胞、Neuro2a细胞
GDM-1细胞系相关产品：MCF7-GFP细胞、B16 melanoma F10细胞、UWB1289细胞
QGY-7701细胞系相关产品：CMT 93细胞、CAL 12T细胞、U20S细胞
SNU423细胞系相关产品：OCILY-10细胞、GOTO细胞、EFM192A细胞
Farage OL细胞系相关产品：F-36P细胞、SK-RC 52细胞、SK-MEL5细胞
HCC-1143细胞系相关产品：University of Michigan-Urothelial Carcinoma-3细胞、VMCUB-1细胞、M-07e细胞
H-3255细胞系相关产品：HT 1080细胞、RL95细胞、B16-F10--RED细胞
HFF1细胞系相关产品：BNL 1ME A.7R.1细胞、MB39细胞、H295R-S1细胞
JC细胞系相关产品：NCI H157细胞、THEECs细胞、MDCKII-WT细胞
NCIH1048细胞系相关产品：SW-1573细胞、OCIAML5细胞、MDCC-MSB1细胞
MHCC 97细胞系相关产品：LL2细胞、EL-4细胞、MDA-kb2细胞
SKNEP-1细胞系相关产品：HuLEC-5a细胞、KM-12细胞、786-O细胞
MCA 205细胞系相关产品：SW 1417细胞、Vero-E6细胞、SCL1细胞
COLO-1细胞系相关产品：Hs 766T细胞、OACP4 C细胞、Hs-675-T细胞
KALS1细胞系相关产品：NCIH209细胞、2BS细胞、Cloudman S91 melanoma细胞
KALS1细胞系相关产品：NCIH209细胞、2BS细胞、Cloudman S91 melanoma细胞
NIH3T3细胞系相关产品：MGH-U1细胞、266 Bl细胞、TE-4细胞
GM03571细胞系相关产品：Fetal Rhesus Kidney-4细胞、HCC-1395细胞、SU86.86细胞
LLC-MK2 Cell:恒河猴肾细胞系
LY-R细胞系相关产品：EJ1细胞、A498细胞、Colon-26细胞
HCC-4006细胞系相关产品：SNU869细胞、H-841细胞、Suzhou Human Glioma-44细胞
C28/I2细胞系相关产品：CHO/dhFr-细胞、Hos TE-85细胞、526 mel细胞
HNE1细胞系相关产品：RINm5F细胞、TE-14细胞、AX-Mel细胞
OV90细胞系相关产品：McG-1细胞、Hs 821.T细胞、PANC-03-27细胞
DanG细胞系相关产品：207细胞、TGW细胞、T2(174 x CEM.T2)细胞
T-24细胞系相关产品：SK-ML2细胞、Walker 256细胞、BL-6细胞
H-2066细胞系相关产品：OVCA433_Bast细胞、RKO-AS-45-1细胞、Panc 02细胞
PNT1/A细胞系相关产品：HCC-1599细胞、Hs729T细胞、NRK-49F细胞
C3H/10T1/2细胞系相关产品：JIMT-1细胞、SF763细胞、RTMC细胞
CHO-ori细胞系相关产品：FL 62891细胞、X63-Ag 8.6.5.3细胞、HCASMC细胞
NCIH1975细胞系相关产品：SW 480细胞、HUT-28细胞、EFM192B细胞
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