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aladdin 阿拉丁 C301898 Western及IP细胞裂解液 无抑制剂

Cell Total Protein Lysate for Western Blotting & Immunoprecipitation
227.90 100ml 起订
上海 更新日期:2024-08-16

上海阿拉丁生化科技股份有限公司

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邮箱:market@aladdin-e.com

产品详情:

中文名称:
Western及IP细胞裂解液
英文名称:
Cell Total Protein Lysate for Western Blotting & Immunoprecipitation
品牌:
阿拉丁
产地:
上海
保存条件:
2-8°C储存
纯度规格:
无抑制剂
产品类别:
蛋白质 蛋白质电泳和蛋白质印迹
运输条件:
冰袋运输
产品规格:
100ml
货号:
C301898
是否进口:

中文名:Western及IP细胞裂解液

英文名:Cell Total Protein Lysate for Western Blotting & Immunoprecipitation

纯度:无抑制剂

货号:C301898

包装:100ml

存储温度:2-8°C储存

产品介绍:

产品介绍:

Western及IP细胞裂解液(Cell Total Protein Lysate for Western Blotting & Immunoprecipitation)是一款较为常用的,针对免疫沉淀实验的蛋白裂解液。所采用的提取方法较为温和,所获得的蛋白质可用于Western Blot、免疫沉淀和免疫共沉淀等。
使用方法:
 (一)贴壁培养细胞1.取本品置于室温溶解混匀,根据实验要求加入酶抑制剂。2.去除贴壁细胞的培养液,用 PBS、NS 或无血清培养液清洗1次,低速离心,弃上清,留取沉淀。3.按照 6 孔板每孔加入150~250μl 含有酶抑制剂的裂解液的比例,加入本品。移液器轻轻吹打,使裂解液和细胞充分接触。置于冰上或 4℃裂解,通常裂解液作用于细胞 1~3s 内,细胞就会被裂解。通常 6 孔板每孔细胞加入 150μl 裂解液已经足够,但如果细胞密度非常高可以适当加大裂解液的用量到 200~250μl。4.10000~12000g,4℃离心 5~10min(如无低温离心机,室温下离心亦可),取上清。5.后续的 SDS-PAGE、Western、免疫沉淀和免疫共沉淀等操作。(二)悬浮培养细胞1.取本品置室温溶解混匀后,加入酶抑制剂。2.低速离心悬浮细胞,弃上清,收集沉淀。3.用手指轻弹细胞,使其松散。按照 6 孔板每孔细胞加入150~250μl含有酶抑制剂的裂解液的比例,加入本品。通常 6 孔板每孔细胞加入 150μl 裂解液已经足够,但如果细胞密度非常高可以适当加大裂解液的用量到 200~250μl。再用手指轻弹以充分裂解细胞,充分裂解后应没有明显的细、胞沉淀。4.10000~12000g,4℃离心 5~10min(如无低温离心机,室温下离心亦可),取上清。5进行后续的 SDS-PAGE、Western、免疫沉淀和免疫共沉淀等操作。(三)组织样本1.取本品置于室温溶解混匀后,加入酶抑制剂。2.把组织剪切成细小的碎片,越小越好。3.取在液氮或超低温冰箱中冷冻 30min 以上的组织,迅速用液氮研磨,研磨过程尽量控制在1~2min 之内,以减少蛋白的降解。4.按照每 20mg 组织加入 150~250μl 裂解液的比例,加入含有酶抑制剂的裂解液。冰上或4℃裂解 15~30min。5.步骤 3、4 亦可以采用如下过程:按照每 20mg 组织加入 150~250μl 裂解液的比例加入含有酶抑制剂的本品。用玻璃匀浆器或组织研磨器匀浆,直至充分裂解,该过程尽量控制在 1~2min 之内,以减少蛋白的降解。6.10000~12000g,4℃离心 5~10min(如无低温离心机,室温下离心亦可),取上清。7.进行后续的 PAGE、Western、免疫沉淀和免疫共沉淀等操作。注意事项 1.去除贴壁细胞的培养液后,如果血清中的蛋白没有干扰,可以不用清洗。2.如果裂解不充分可以适当增加裂解液的用量,如果需要高浓度的蛋白样品,可以适当减少裂解液的用量。3.如果细胞量较多,必需分装成 50~100 万细胞/离心管,然后再裂解。大团的细胞较难裂解充分,而少量的细胞由于裂解液容易和细胞充分接触,相对比较容易裂解充分。4.如果组织样品本身非常细小,可以适当剪切后直接加入裂解液裂解,通过强烈 Vorte× 使样品裂解充分。然后同样离心取上清,用于后续实验。直接裂解的优点是比较方便,不必使用匀浆器,缺点是不如使用匀浆器那样裂解得比较充分。5.在低温情况下有可能出现浑浊现象,可 37℃水浴促其溶解,不会影响使用效果;溶解时间不易过长,避免有效成分失效。6.裂解产物中经常会出现一小团透明胶状物,属正常现象。该透明胶状物为含有基因组 DNA 等的复合物。在不检测和基因组 DNA 结合特别紧密的蛋白的情况下,可以直接离心取上清用于后续实验;如果需要检测和基因组结合特别紧密的蛋白,则可以通过超声处理打碎打散该透明胶状物,随后离心取上清用于后续实验。7.细胞裂解的操作步骤,应置于冰上或 4℃进行。
使用范围:
适用于一般生物学及医学研究

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Western及IP细胞裂解液;Cell Total Protein Lysate for Western Blotting & Immunoprecipitation

公司简介

上海阿拉丁生化科技股份有限公司是A股上市公司((股票代码:688179),专注于科研试剂的研发、生产和销售,已陆续建立多个工厂和研发中心。作为领军企业,阿拉丁始终坚持质量第一,连续13年被评为“最受欢迎试剂品牌”。 阿拉丁目前常备库存试剂产品品种超过7万种,SKU总数超过46万,产品线涵盖了化学试剂、生化试剂、药靶配体、蛋白质和抗体等多个领域,是国内少数化学试剂到生物试剂全面发展的国产试剂品牌,产品同步发布在我们国内外电商平台。

成立日期 (16年)
注册资本 14130.676万人民币
员工人数 500人以上
年营业额 ¥ 1亿以上
经营模式 工厂,试剂
主营行业 生物化工,化学试剂

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