细胞分离

分离方法

1. BMSC 的分离：取 4 周龄雄性大鼠颈椎脱臼处死，75% 乙醇浸泡 15 min。无菌条件下分离胫骨、股骨，剪开胫骨、股骨干骺端，再用 1 ml 注射器吸取预冷磷酸盐缓冲液（phosphate buffered saline，PBS）冲洗骨髓腔，获得骨髓细胞悬液，置于含有 10% FBS 和双抗（青霉素 100U/ml、链霉素 100U/L，PH：7.2-7.4）的 DMEM/F-12 中，37 ℃、95%湿度和 5% CO2 培养箱中培养。24 h后首次半量换液，然后每 3 d 全量换液。

2. BMSC 的传代：当黏附细胞长到 80% 融合时可进行细胞传代。倒掉培养瓶中的液体，PBS 冲洗 3 次，加入 0.25% 胰蛋白酶 0.5 mL，轻摇摇动培养瓶，然后培养箱中孵育 5 min。孵育结束后立即倒掉胰酶，迅速加入 0.5 mL FBS 终止消化，然后加入 5 mL PBS，用移液器轻轻吹打瓶底细胞，传代比例为 1：3。

                                                            

   实验结果上图

   
   

   我司从事CRO一站式技术服务、动物造模、细胞实验、蛋白、代谢组学、病理实验、分子实验以及细胞课题和动物课题、等我们有P2、SPF级，有活体成像、病理全扫、硬切、流式周期等公司优势：周期短，价格优惠，质量保证。