"639V Cells(赠送Str鉴定报告)|人膀胱癌细胞
细胞背景资料：膀胱癌；男性
细胞形态：上皮细胞样
解冻细胞常见实验问题分析及推荐解决方法：在解冻冻存细胞时，发现会出现存活率低、大量细胞碎片及生长缓慢等问题，究竟是什么原因导致，我们该怎么进行解决？以下是国内外细胞培养专家针对解冻细胞实验问题，总结的一些解决方案！出现低存活率的可能原因及推荐解决方案如下：１)解冻过程中细胞裂解，推荐的解决方案：可预期到一定量的细胞死亡，因此细胞的浓度应足够GAO，考虑到这一损失。起始浓度为１*１０(６)至１*１０(７)细胞/毫升；２)解冻过程中的问题，推荐的解决方案：在-７０℃至-８０℃下保存冷冻的培养物，保存时间为１-５天，但这不是保存的方法。在３７℃充分解冻后应立即开始培养；３)对冷冻液过敏，推荐的解决方案：A.完全或部分更换培养基，减少培养基中冷冻液的量。在２４小时后更换培养液体可全部去除冷冻液。B.留出更多时间供培养物恢复。有时细胞需要几周时间才能形成单层或密集的悬浮物，取决于冷冻时细胞的年龄或传代次数或在生长阶段中的位置。冷冻的Zui佳条件在对数期；４)被冷冻的原种细胞的年龄或冷冻时培养物的年龄，推荐的解决方案：解冻Zui近冷冻的细胞。细胞处于冷冻状态的时间越长，存活率越低。检查冷冻细胞的时间和方法。在冷冻时细胞应处于对数期。
细胞生长：贴壁
NCI-H157细胞类似产品：：Tu 212细胞、SUD4细胞、CAL 12T细胞
T8细胞类似产品：：Lu-65细胞、SK-SH-SY5Y细胞、RCC23细胞
H4IIEC3细胞类似产品：：Virginia Mason Research Center-Lung Cancer D细胞、MM1-S细胞、HCC2108细胞
N9细胞类似产品：：KB细胞、KU-812-F细胞、HT144mel细胞
OUMS-27细胞类似产品：：KYSE270细胞、H774细胞、B-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1细胞
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细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
[细胞产品包装]鲜活细胞：T２５培养瓶(一瓶)或冻存细胞：１ml冻存管(两支)
在细胞培养过程中会出现这样或那样的问题，客户遇到的问题从细胞生长角度来说，针对细胞培养过程中生长不HAO、甚至死亡的原因，我们做以下分析并提出相对应的解决方法。一、培养细胞生长不HAO》可能原因：细胞本身的状态》1)细胞传代次数多，细胞老化；2)细胞的接种量：接种量过低，细胞生长缓慢；3)细胞传代时间过晚：细胞中毒，影响传代后的细胞生长；4)胰酶消化时间过长或过短：时间过长，细胞死亡；时间过短，细胞未完全分离而成团，细胞死亡；5)细胞的冻存与复苏：慢冻速融。污染：1)支原体污染；2)霉菌污染；培养基或血清：1)更换血清或培养基之前未进行验证；2)选择的培养基是否合适；3)培养基配制是否准确无误；培养环境：1)CO2供应是否正常；2)培养箱或摇床温度控制是否正确；解决方法：根据以上四个方面的可能原因，做出针对性的解决方案》1)注意细胞的本身状态：如传代次数、接种量等；2)避免产生污染（用正规、合法、可溯源的血清）；3)要用合适的血清或培养基，ZuiHAO经过验证；4)注意实验室的环境；二、培养细胞死亡》可能原因：1)培养箱内无CO2；2)培养箱内温度波动太大；3)细胞冻存或复苏过程中损伤；4)培养液渗透压不正确；5)培养液中有毒代谢产物堆积；解决方法：1)检测培养箱内CO2；2)检查培养箱内温度；3)取新的保存细胞种；4)检测培养液渗透压；5)换入新鲜培养液。
细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
Panc_04_03细胞类似产品：：YD38细胞、J 111细胞、SNU-739细胞
74Int细胞类似产品：：RT-BM细胞、H-1581细胞、H6c7细胞
CAL 27细胞类似产品：：NIH:OVCAR-4细胞、OCI Ly19细胞、H1373细胞
BNL.1ME A.7R.1细胞类似产品：：NCI-H740细胞、NCI-SNU-C1细胞、3T3-Swiss albino细胞
HCC-15细胞类似产品：：MRMT-1细胞、Swiss 3T3细胞、OCI-Ly1细胞
细胞来源说明：来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库
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细胞生长特性：贴壁
SCC-9细胞类似产品：：Ls-174-T细胞、TU 686细胞、A2780/CP70细胞
Astrocyte type I clone细胞类似产品：：NCI-SNU-1细胞、H2.35细胞、SHI1细胞
HCC9724细胞类似产品：：BIU87细胞、MRAEC细胞、T-47D细胞
343MG细胞类似产品：：Fox/NY细胞、ECC-12细胞、BCP-1细胞
WM266细胞类似产品：：KE-39细胞、NTERA2-cloneD1细胞、293EBNA细胞
NBLAN5T细胞类似产品：：KFB细胞、HEL-299细胞、CEK细胞
常见细胞培养中一些问题总结：１)培养基中血清的比例多少合适？血清是细胞培养上一个极为重要的营养来源，所以血清的含量多少会对细胞的生长会产生极大的影响。血清的含量一般为５%-１５%，不要低于５%或GAO过２０%，因为含量过低会导致细胞营养不足，过GAO则会破坏渗透压平衡。一般建议血清含量为１０%，可以适量加减；２)何时须更换培养基？视细胞生长密度而定，或遵照细胞株基本数据上的更换时间，按时更换培养基即可。还可以参照指示剂的颜色变化进行更换；３)购买的复苏细胞，为何会有脱落？因为运输的过程中不可避免的会有震荡，收到后可以离心收集；４)购买的细胞冷冻管经解冻后，为何会发生细胞数目太少之情形？研究人员在冷冻细胞之培养时出现细胞数目太少，大都是因为离心过程操作上的失误，造成细胞的物理性损伤，以及细胞流失。建议细胞解冻后不要立刻离心，应待细胞生长隔夜后再更换培养基即可；５)购买的细胞死亡或细胞存活率不佳可能原因？研究人员在细胞培养时出现存活率不佳，常见原因可归纳为：培养基使用错误或培养基品质不佳。血清使用错误或血清的品质不佳。解冻过程错误。冷冻细胞解冻后，加以洗涤细胞和离心。悬浮细胞误认为死细胞。培养温度使用错误。细胞置于–８０°C太久；６)收到的冷冻管瓶身破裂，瓶盖有裂纹，或瓶盖脱落之原因？冷冻管瓶盖裂纹，或瓶身破裂，可能是因为操作者夹取冷冻管时用力不当，造成冷冻管裂损，建议使用止血钳小心夹取。另冷冻管瓶盖松动或松脱，乃因热胀冷缩之物理现象，冷冻管有可能因此而造成细胞污染，故冷冻管于放入和取出液氮桶时，均应立刻将冷冻管再一次扭紧。
细胞复苏后贴壁细胞较少的问题分析：总结１：复苏过程没有问题，是否是从液氮拿出直接放入温水，还有培养箱，二氧化碳浓度，培养基、PH值等环节。要么加GAO浓度FBS １５-２０%，看看能否帮助贴壁，当然也需要考虑血清问题，还有确信拿来的细胞没问题。总结２：首先应该怀疑冻存，实际上复苏出问题的可能非常小，因为操作简单，而且死板。１、你冻存的时候是不是消化的时间过长，这是一般人所注意不到的，即使书上也不讲这个问题，太长的消化时间会让细胞复苏时失去贴壁能力，表现为先贴后死，原因是在你复苏的时候细胞已进入凋亡程序，不可逆转的死亡。２、你的冻存液HAO不HAO，是什么，甘油还是DMSO，质量非常重要，否则也会死亡。３、你的冻存液的量加的是不是太多，ATCC推荐是不超过７%，大于５%，太多也不HAO。４、你在冻存的时候是不是把DMSO混均匀，这个有一些影响，但不算太大。５、你的冻存是否按部就班，就是所温度梯度是不是把握严格，很多人容易忘却这个事情，因为这个东西流程长。６、如果你细胞污染，你是否能很快看到，我比我的导师能早一天看到污染。从这个角度讲建议去除离心这步。７、你的细胞在冻存前是否过密。还有，不赞成孵箱污染这个概念的，所有在一个孵箱里的细胞都污染一个细菌的话，这个细菌是源于孵箱的，但这不代表孵箱污染，因为孵箱无论你如何处理都有大量的细菌，问题在操作。每次污染的原因都要尽可能的找，以后就不犯同样的问题，这个很重要，不能靠猜，否则你就有可能细胞养绝Zui后换课题，这个见得太多了，别不当会事。
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UMUC14细胞类似产品：：Mono Mac 1细胞、CT26-clone 25细胞、MNNG-HOS细胞
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Karpas422细胞类似产品：：CAL 12细胞、Hepa 1-6细胞、W133细胞
SK Mel 24细胞类似产品：：Earle's L cells细胞、SNK-6细胞、Mono Mac 6细胞
PaCa2细胞类似产品：：NTera-2D1细胞、118MG细胞、OCILY19细胞
NCI-BL6细胞类似产品：：HEC251细胞、TE15细胞、BJ1细胞
PBL细胞类似产品：：H35细胞、RAW 264.7细胞、MA-782细胞
C22细胞类似产品：：OVCAR 420细胞、Ca759细胞、NCIH1417细胞
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HANK1细胞类似产品：：MCA-38细胞、H-1781细胞、NCI-H322细胞
L5178Y TK+/-3.7.2c细胞类似产品：：293S细胞、A375mel细胞、H4IIEC3细胞
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C3H10T1/2CL8细胞类似产品：：SKNFI细胞、TE-15细胞、H-2073细胞
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Fetal Bovine Heart Endothelial细胞类似产品：：HT22细胞、U 266细胞、PLCPRF5细胞
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SK-N-F1细胞类似产品：：Hs 274.T细胞、IM-95细胞、SW 1271细胞
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266 Bl细胞类似产品：：GM03671C细胞、KM-H2细胞、SACC-83细胞
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Mevo细胞类似产品：：Sci-1细胞、BxPC-3细胞、MDA2B细胞
NCI-SNU-182细胞类似产品：：HIC细胞、WEHI-231细胞、PNT1/A细胞
SF-763细胞类似产品：：CCRF SB细胞、RH8994细胞、L cell line细胞
CNE2细胞类似产品：：WEHI 3细胞、HuPT3细胞、ECV细胞
SK-N-BE(1)n细胞类似产品：：NSC34细胞、H-2023细胞、EAHY-926细胞
Lilly Laboratories Cell-Monkey Kidney 2细胞类似产品：：NFHIOSE-29细胞、A 2058细胞、H-2347细胞
A-431细胞类似产品：：RL95-2细胞、Raji细胞、SKBR-3细胞
HK2细胞类似产品：：OCI-Ly 10细胞、2E8细胞、H-4-II-E细胞
Hs-27细胞类似产品：：SKNBE2细胞、NTERA2-D1细胞、SNU5细胞
Caco-2BBe细胞类似产品：：SW 954细胞、SCC-9细胞、NCI-H2141细胞
SBC-3细胞类似产品：：HCC4006细胞、NCIH716细胞、RM-1细胞
SK-N-BE(2)C细胞类似产品：：MDA-MB157细胞、P3.NS-1/1.Ag4.1细胞、Raji细胞
DoTc2 4510细胞类似产品：：COLO201细胞、HEC1A细胞、HCCC-9810细胞
HTori-3细胞类似产品：：LM6细胞、SK Mel 2细胞、WIL2 Secreting细胞
CX-1细胞类似产品：：AML-193细胞、SNU-182细胞、Hs-600-T细胞
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