"SG231 Cells(赠送Str鉴定报告)|人胆管上皮癌细胞
细胞背景资料：肝内胆管癌；男性
细胞形态：上皮细胞样
传代培养及其操作步骤：原代细胞培养成功以后，需要进行分离培养，否则细胞会因生存空间不足或密度过大，营养障碍，影响细胞生长。细胞由原培养瓶内分离稀释后传到新的培养瓶中培养的过程称之为传代培养。传代细胞允许培养的细胞扩增(形成细胞株)，可以进行细胞克隆，易于保存，但可能丧失一些殊的细胞和分化征。传代细胞形成细胞株的Zui大利处在于提供了大量持久的实验材料，便于实验。【操作步骤】１)吸掉或倒掉培养瓶内旧培养液；２)向瓶内加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆盖培养瓶底为宜；３)置３７℃孵箱或室温(２５℃温度)下进行消化，２~５min后把培养瓶放在倒置显微镜下进行观察，当发现胞质回缩、细胞间隙增大后，应立即中止消化；４)吸出消化液，向瓶内加入Hanks液少量，轻轻转动培养瓶，把残留消化液冲掉，然后再加培养液。如果仅使用胰蛋白酶消化，在吸除胰蛋白液后，可直接加入少量含血清的培养液，终止消化；５)使用弯头吸管，吸取瓶内培养液，按顺序反复轻轻吹打瓶壁细胞，使之从瓶壁脱离形成细胞悬液。吹打时动作要轻柔，以防用力过猛损伤细胞；６)用计数板计数后，分别接种于新的培养瓶中，置CO２培养箱中进行培养；７)细胞培养换液时间应根据细胞生长的状态和实验要求来确定。一般２～３d后应换一次生长液。待细胞铺满器皿底面，即可使用；也可继续传代扩大培养或换成维持液。【注意事项】１)掌握HAO细胞消化的时间，消化时间过短时，细胞不宜从瓶壁脱落，过长的消化会导致细胞脱落、损伤；２)掌握HAO消化浓度，当消化液浓度过GAO时，消化时间应缩短，过低时细胞消化时间相对延长。
细胞生长：贴壁
COR L279细胞类似产品：：LAN-1细胞、BLO 11细胞、MDA-157细胞
TE8细胞类似产品：：RASMC细胞、NKM-1细胞、PLA-801D细胞
MBVP细胞类似产品：：COLO-16细胞、Human Corneal Endothelial Cells-12细胞、SK-N-DZ细胞
SW-1990细胞类似产品：：H-2342细胞、NB19-RIKEN细胞、SKNEP细胞
95-D细胞类似产品：：Line 870 Emory University-4细胞、SHP77细胞、SCI1细胞
SG231 Cells(赠送Str鉴定报告)|人胆管上皮癌细胞
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
[细胞产品包装]鲜活细胞：T２５培养瓶(一瓶)或冻存细胞：１ml冻存管(两支)
在细胞培养过程中会出现这样或那样的问题，客户遇到的问题从细胞生长角度来说，针对细胞培养过程中生长不HAO、甚至死亡的原因，我们做以下分析并提出相对应的解决方法。一、培养细胞生长不HAO》可能原因：细胞本身的状态》1)细胞传代次数多，细胞老化；2)细胞的接种量：接种量过低，细胞生长缓慢；3)细胞传代时间过晚：细胞中毒，影响传代后的细胞生长；4)胰酶消化时间过长或过短：时间过长，细胞死亡；时间过短，细胞未完全分离而成团，细胞死亡；5)细胞的冻存与复苏：慢冻速融。污染：1)支原体污染；2)霉菌污染；培养基或血清：1)更换血清或培养基之前未进行验证；2)选择的培养基是否合适；3)培养基配制是否准确无误；培养环境：1)CO2供应是否正常；2)培养箱或摇床温度控制是否正确；解决方法：根据以上四个方面的可能原因，做出针对性的解决方案》1)注意细胞的本身状态：如传代次数、接种量等；2)避免产生污染（用正规、合法、可溯源的血清）；3)要用合适的血清或培养基，ZuiHAO经过验证；4)注意实验室的环境；二、培养细胞死亡》可能原因：1)培养箱内无CO2；2)培养箱内温度波动太大；3)细胞冻存或复苏过程中损伤；4)培养液渗透压不正确；5)培养液中有毒代谢产物堆积；解决方法：1)检测培养箱内CO2；2)检查培养箱内温度；3)取新的保存细胞种；4)检测培养液渗透压；5)换入新鲜培养液。
细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
IEC18细胞类似产品：：MB231细胞、SU-DHL1细胞、QBC-939细胞
ACC-3细胞类似产品：：4T1-LUC细胞、HRA 19细胞、SUM-149细胞
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751细胞类似产品：：SK-NEP-1细胞、H-1792细胞、RIN-14B细胞
HuH-1细胞类似产品：：NIH:OVCAR-8细胞、DHL10细胞、NCI-H2291细胞
细胞来源说明：来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库
SG231 Cells(赠送Str鉴定报告)|人胆管上皮癌细胞
细胞生长特性：贴壁
SW 780细胞类似产品：：Hs-695-T细胞、H82sclc细胞、H-1734细胞
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MuM-2C细胞类似产品：：Hs688(A)T细胞、Calu6细胞、OV2008细胞
如何进行细胞复苏：１)从液氮容器中取出冻存管，直接浸入３７℃温水中，并不时摇动令其尽快融化；２)从３７℃水浴中取出冻存管，打开盖子，用吸管吸出细胞悬液，加到离心管并滴加１０倍以上培养液，混匀；３)离心，１０００rpm，５min；４)弃去上清液，加入含１０%小牛血清培养液重悬细胞，计数，调整细胞密度，接种培养瓶，３７℃培养箱静置培养；５)次日更换一次培养液，继续培养。【温馨提醒】１)从增殖期到形成致密的单层细胞以前的培养细胞都可以用于冻存，但ZuiHAO为对数生长期细胞。在冻存前一天ZuiHAO换一次培养液；２)将冻存管放入液氮容器或从中取出时，要做HAO防护工作(戴棉手套)，以免冻伤；３)冻存和复苏ZuiHAO用新配制的培养液。细胞复苏的时候，有些初次实验员将冻存管从液氮中取出后，放在室温下，经常发生冻存管爆炸，该怎么避免出现这种情况吗？其中在拧紧冻存管的时候是否有哪些细节要注意的？一般常用的方法是取出冻存管后在超净工作台中用酒精棉球擦试管口，再稍拧松盖子，再放３７度水浴锅中摇溶，在将细胞转移到装有３７度预热过的培养基的试管中，迅速离心，再用培养基洗一遍。
贴壁消化难题：１，先用PBS 把细胞洗两遍，使瓶内没有血清了，减少对胰酶的中和，然后用新配的０.２５%的胰酶加入３ml左右，放在３７度，然后可以在细胞有些消化下来时，拿着瓶口，运用手腕的力量轻轻震荡瓶内液体，这样细胞很快就下来了，还不需要吹打，分散也均匀；２，成团、絮状：消化液里加入edta可以减少细胞成团的现象，血清可以终止胰酶的作用，如果是进口血清的话也能终止edta的作用。用胰酶消化后胰酶可以倒掉，也可以不倒，直接加血清终止，如果消化液中加入了edta的话，就要将消化液倒干净，如果细胞贴壁要求不是很严格的话，一般不需要进行离心。鼻咽癌细胞的贴壁能力很强，用０.５%胰酶(含０.１%EDTA)一般要消化１２~１５min。用PBS洗涤时要洗净残余的培养基，加入胰酶后在培养箱中消化(避免细胞室温下受损以及在此温度时胰酶活性Zui强)至细胞收缩变圆(可显微镜下观察)且有少许细胞脱落(有流下来的趋势)，随后立即弃去胰酶(如果脱落的细胞很多且需要大量细胞实验，则不能弃去胰酶)，加入培养基仔细吹打(不能用无血清培养基或者PBS替代，否则细胞聚集成团块或絮状)。一般我都离心一次弃去上清(去除残留的胰酶及漂浮的死细胞或细胞碎片)；消化过度：马上用培养基中和，用吸管吹打细胞，收集全部的细胞到以无菌的离心管中８００RPM ３分钟。弃上清，用全培重悬，换新的培养瓶继续培养，状态不HAO的细胞在培养的过程中会死亡脱落，在换液的时候可以清除掉！
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VP 267细胞类似产品：：Statens Seruminstitut Rabbit Cornea细胞、ELD-1细胞、GM03190细胞
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JM1细胞类似产品：：MG-HU-3细胞、MOLT 4细胞、S3-HeLa细胞
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H1876细胞类似产品：：22Rv-1细胞、Mo7e细胞、GC9811-P细胞
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SG231 Cells(赠送Str鉴定报告)|人胆管上皮癌细胞
NCI-H748细胞类似产品：：ARH 77细胞、Embryonic Bovine Tracheal cells细胞、COR-L26细胞
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JURKAT E-6.1细胞类似产品：：MEL细胞、NCIH647细胞、Balb/c3T3细胞
Mel624细胞类似产品：：NCIH847细胞、CAL 148细胞、SK Mel 24细胞
Hs729细胞类似产品：：Panc 08.13细胞、HONE1细胞、MC3T3-E细胞
KU 812细胞类似产品：：A9 (Hamprecht)细胞、SK-MEL-28细胞、SKUT-1细胞
N-87细胞类似产品：：108CC15细胞、Hs 895 T细胞、KYSE 520细胞
H295R细胞类似产品：：Mia PACA 2细胞、MM134细胞、H660细胞
PLMVEC细胞类似产品：：JB6 clone 30, subclone 7b细胞、HTh-74细胞、L(TK-)细胞
P31FUJ细胞类似产品：：DHL-16细胞、ME1细胞、FU-OV-1细胞
ATC241细胞类似产品：：HT 1080.T细胞、H4IIE细胞、HCC-1954BL细胞
BALL1细胞类似产品：：Wien 133细胞、HEB细胞、NCI-H-82细胞
HIT T-15细胞类似产品：：CORL23细胞、HRMC细胞、YAC细胞
Chang liver细胞类似产品：：P3X63NS1细胞、UMR106细胞、CEF细胞
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