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THP-1人单核细胞白血病

THP-1人单核细胞白血病,,结构式
THP-1人单核细胞白血病
  • CAS号:
  • 英文名:THP-1 human monocytic leukemia
  • 中文名:THP-1人单核细胞白血病
  • CBNumber:CB55536107
  • 分子式:
  • 分子量:0
  • MOL File:Mol file

THP-1人单核细胞白血病性质、用途与生产工艺

  • 简介 THP-1人单核细胞白血病是人外周血的单核细胞系,最初来源于急性单核细胞性白血病患者。属于悬浮细胞,适合用于转染或感染实验。其表面抗原HLA型为:A2,A9,B5,DRw1,DRw2。该细胞对乳汁珠和激活的红细胞有吞噬作用,无表面和胞质免疫球蛋白。可以用佛波醇TPA诱导单核细胞分化。
  • 培养步骤

    培养基及培养冻存条件准备:

    1)准备RPMI-1640培养基;胎牛血清,10%;0.05 mMβ-巯基乙醇;双抗,1%。

    2)培养条件:气相:空气,95%;二氧化碳,5%。温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。

    3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配。

    细胞处理:

    1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入250px皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。

    2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。

    收集细胞,1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

    细胞冻存:

    1,细胞冻存时,取上清,可使用血球计数板计数。

    2,4min,1000rpm离心去掉上清。加1ml血清重悬细胞,根据细胞数量加入血清和DMSO,轻轻混匀,DMSO终浓度为10%,细胞密度1-2xE6/ml,每支冻存管冻存1ml细胞悬液,注意冻存管做好标识。

    3,将冻存管置于程序降温盒中,放入-80度冰箱,至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。

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